有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)的原理是加入有機溶劑使水溶液的介電常數(shù)降低,因而增加了兩個相反電荷基團之間的吸引力,促進了蛋白質(zhì)分子的聚集和沉淀一有機溶劑沉淀法 利用與水互溶的有機溶劑如甲醇乙醇丙酮等能使蛋白質(zhì);蛋白沉淀法是毒物分析過程中對生物樣品進行前處理的一種常用方式對于富 含蛋白質(zhì)的檢材,在進行分離提取時要將 大量干擾測定的蛋白質(zhì)沉淀除去,使待測毒 物仍留存于溶液中操作時一般要先將檢材組織磨碎,然后再加入。
利用與水互溶的有機溶劑如甲醇乙醇丙酮等能使蛋白質(zhì)在水中的溶解度顯著降低而沉淀的方法,稱為有機溶劑沉淀基本介紹 中文名 有機溶劑沉淀法 外文名 Organic solvent precipitation method 拼音 youji;甲醇乙醇丙酮等有機溶劑可以提供自己的羥基或羰基上的氫或氧去形成氫鍵,從而破壞了蛋白質(zhì)中原有的氫鍵,使蛋白質(zhì)變性而引起蛋白質(zhì)沉淀的原因一方面是由于甲醇乙醇丙酮等有機溶劑加入水中使溶劑介電常數(shù)降低,增加了。
甲醇會使蛋白變性嗎
甲醇和高氯酸沉淀蛋白的區(qū)別 鹽析法 多用于各種蛋白質(zhì)和酶的分離純化在蛋白質(zhì)溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質(zhì)的膠體穩(wěn)定性而使其析出,這種方法稱為鹽析常用的中性鹽有硫酸銨硫酸鈉氯化鈉等各種蛋白質(zhì)鹽析。
原理是與水互溶的有機溶劑如甲醇乙醇能使一些蛋白質(zhì)在水中的溶解度顯著降低而且在一定溫度pH值和離子強度下,引起蛋白質(zhì)沉淀的有機溶劑的濃度不同,因此,控制有機溶劑的濃度可以分離純化蛋白質(zhì)。
甲醇蛋白沉淀法
1、甲醇沉淀蛋白優(yōu)點1分辨能力比鹽析法高,即蛋白質(zhì)或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉淀2沉淀不用脫鹽,過濾較為容易乙腈優(yōu)點又名甲基氰,無色液體,極易揮發(fā),有類似于醚的特殊氣味,有優(yōu)良的溶劑性能。
2、乙腈和甲醇是常用的溶劑,在生物樣品沉淀中常被用到乙腈和甲醇有一些獨特的特性,使它們在生物樣品沉淀中更加有效首先,乙腈和甲醇都具有很好的溶解能力,可以溶解大多數(shù)蛋白質(zhì)和核酸因此,在沉淀生物樣品時,乙腈和甲醇。
3、能破壞蛋白質(zhì)的水化膜是蛋白質(zhì)沉淀的物質(zhì)與水混合的有機溶劑,如酒精甲醇丙酮等,對水的親和力很大,能破壞蛋白質(zhì)顆粒的水化膜,在等電點時使蛋白質(zhì)沉淀。
4、不能用 甲醇導(dǎo)致蛋白質(zhì)永久變性 不能負性 提取質(zhì)粒過程中除去蛋白很重要,采用酚去除蛋白效果較單獨用酚好,要將蛋白盡量除干凈需多次抽提沉淀DNA通常使用冰乙醇,在低溫條件下放置時間稍長可使DNA沉淀完全沉淀DNA也可用異。
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