保持蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)蛋白中如果有二硫鍵存在的話,會容易被氧化斷開,有了巰基乙醇還原性的物質(zhì)就可以免除這一隱患祝您早日康復(fù);還原劑可以使蛋白質(zhì)的二硫鍵打開,比如2巰基乙醇betaME二硫蘇糖醇DTT二硫鍵是2個SH基被氧化而形成的SS形式的硫原子間的鍵打開二硫鍵就是破壞這種氧化作用,加入適量的還原劑就可以達到目的但隨著還原劑被空氣中的氧氣氧化,二硫鍵也會重新形成胰島素是蛋白分子,所以A。
巰基乙醇保護醛基 2巰基乙醇,又稱為β巰基乙醇,是一種有機化合物,分子式為C2H6OS,為無色揮發(fā)性液體,具有較強烈的刺激性氣味。
β巰基乙醇和巰基還原劑
1、作為一種相對穩(wěn)定的共價鍵,二硫鍵在蛋白質(zhì)分子中扮演著穩(wěn)定肽鏈空間結(jié)構(gòu)的重要角色蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵數(shù)量越多,其對外界影響的穩(wěn)定性也就越強二硫鍵不僅與蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)及其生物活性密切相關(guān),還與蛋白質(zhì)的復(fù)性過程有所關(guān)聯(lián)例如,核糖核酸酶A在經(jīng)過巰基乙醇還原劑和尿素蛋白質(zhì)變性劑。
2、二硫鍵在蛋白質(zhì)的生物活性和復(fù)性過程中扮演著關(guān)鍵角色例如,核糖核酸酶A在遇到巰基乙醇還原劑和尿素蛋白質(zhì)變性劑的影響后,會發(fā)生變性,其中的四個二硫鍵斷裂,導(dǎo)致多肽鏈的結(jié)構(gòu)展開,原有的高級結(jié)構(gòu)也因此發(fā)生改變,喪失其生物學(xué)功能然而,如果通過透析方法去除大量的還原劑和變性劑,僅留下。
3、蛋白質(zhì)是會變性,但是不會有沉淀,因為SDS會使蛋白質(zhì)分子折疊成短棒狀 ,并且?guī)ж撾?,蛋白質(zhì)都帶了負電,分子間就會有靜電排斥,也就不能凝集,便不會有沉淀。
巰基乙醇還原二硫鍵機理
SEC結(jié)果有聚體,抗體還原后跑SDSPAGE結(jié)果跟沒有聚體是一樣的,因為加了巰基乙醇之類的還原劑還原之后抗體二硫鍵破壞,其他分子間作用力也會被破壞,原來的聚體就變成了還原后的輕重鏈片段。
beta巰基乙醇是還原劑,可以還原蛋白高級結(jié)構(gòu)中的二硫鍵,解開蛋白的高級結(jié)構(gòu),有一些裂解液中加入beta巰基乙醇以后,裂解液的保質(zhì)期會變短。
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