早上好,IPA不能溶解無機鹽和有機鹽,所以會沉淀析出,你換成甲醇或者乙醇就會輕得多,水浴加熱到40度時甲醇和乙醇對無機鹽和一部份有機鹽的溶解度會大幅度上升重新變回無色清澈溶液的如果你用SDSSDBS或者FMES等陰離子表活來提取的話,IPA效果比甲乙醇是要好的,請參考一般情況下無機鹽和有機類。

有害的,首先制膠中使用丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺具有神經(jīng)毒性作用,人體吸收后可致基因突變裂解液含PMSF劇毒,嚴重損害呼吸道粘膜眼睛及皮膚過硫酸銨對皮膚粘膜有刺激性和腐蝕性甲醇有較強的毒性,對人體的神經(jīng)系統(tǒng)和血液系統(tǒng)影響大DAB有較強的致癌性 這只是我自己的看法,呵呵;1當然是膠的濃度9kda的話要適當增大,1520%應(yīng)該差不多吧如果實在不行還能考慮用gradient gel2二是轉(zhuǎn)膜緩沖液,內(nèi)要含20%甲醇,新鮮配制,反復使用的話注意甲醇會蒸發(fā)掉如果連續(xù)使用的話兩三次應(yīng)該還可以甲醇一是能夠洗掉跑膠時泡透了的SDSSDS使蛋白帶負電,方便移動,二是幫助。

脫色液50%的甲醇,7%的冰醋酸的水溶液。

蛋白質(zhì)變性劑的作用是破壞蛋白質(zhì)的次級鍵,如氫鍵鹽鍵和疏水力,引起天然構(gòu)象的解體它們并不破壞共價鍵,如肽鍵和二硫鍵,故不涉及一級結(jié)構(gòu)的改變變性劑有溶解型和沉淀型兩類,SDS尿素和胍鹽是有效的溶解型變性劑,而三氯乙酸甲醇和氯仿異戊醇是有效的沉淀變性劑一般而言,變性劑應(yīng)用時常大大。

反相系統(tǒng)吧用10%或者15%的甲醇水或者乙腈水,10mlmin沖洗1小時,然后在用甲醇或者乙腈封存色譜柱十二烷基硫酸,也就是SDS,是一種表面活性劑對色譜柱的傷害挺大的盡可能地多沖一會兒甲醇水,盡量把柱子里面殘留的東西沖出來;甲醇引起的膠面皺縮,建議使用BioRad的BioSafe考染試劑,無需甲醇脫色,1小時完成染色脫色全過程,靈敏度達到8ng。