醇沉法Alcohol Precipitation是利用有效成分能溶于乙醇而雜質(zhì)不溶于乙醇的特性,在加入乙醇后,有效成分轉(zhuǎn)溶于乙醇中而雜質(zhì)則被沉淀出來的方法醇沉的目的是除去雜質(zhì)保留藥物有效成分二內(nèi)容簡介 醇沉法就是利用有效成分;乙醇沉淀法,簡稱醇沉法,是利用有效成分能溶于乙醇而雜質(zhì)不溶于乙醇的特性,在加入乙醇后,有效成分轉(zhuǎn)溶于乙醇中而雜質(zhì)則被沉淀出來的方法醇沉的目的是為了除去雜質(zhì)保留藥物有效成分醇沉的目的是為了除去水煎液中淀粉樹。
實(shí)際生產(chǎn)中對濃縮藥液和濃乙醇體積,用量取法很不方便,均用稱重法生產(chǎn)中常用回收乙醇來沉淀雜質(zhì),其量不夠時(shí)再用濃乙醇補(bǔ)足4冷藏與處理加乙醇時(shí)藥液的溫度不能太高,加至所需含醇量后,將容器口蓋嚴(yán),以防;核酸酶在體外適宜的條件也可以降解DNA,因此提核酸要在低溫下進(jìn)行,盡量減少DNA的降解所以要將乙醇預(yù)冷用無水乙醇沉淀DNA原因 用無水乙醇沉淀DNA,這是實(shí)驗(yàn)中最常用的沉淀DNA的方法乙醇的優(yōu)點(diǎn)是可以任意比和水相混溶。
低溫乙醇沉淀法原理
1、1酒精沉淀法1有機(jī)物沉淀這種方法適用于從有機(jī)溶劑中分離和純化有機(jī)物當(dāng)乙醇與有機(jī)物混合時(shí),由于氫鍵和靜電相互作用力的改變,使得有機(jī)物的溶解度下降,導(dǎo)致有機(jī)物生成固態(tài)顆粒沉淀通過離心過濾或沉淀收集。
2、酶切后片段直接用無水乙醇沉淀的方法 把酶切體系先加入等體積氯仿抽提,然后離心去掉氯仿,取水層,加入2倍體積的冷乙醇,混勻放入低溫冰箱進(jìn)行醇沉然后再離心吸掉乙醇晾干,用純水溶解就行了 需要注意的就是醇沉之后的離。
3、在常溫下,有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性例如酒精消毒滅菌就是如此因此,操作要求在低溫下進(jìn)行有機(jī)溶劑的選擇首先是能和水混溶,使用較多的有機(jī)溶劑是乙醇甲醇丙酮,還有二甲基甲酰胺二甲基亞砜乙腈和2甲基2,4。
低溫乙醇沉淀法分離血漿蛋白的溫度為
影響因素第1乙醇使蛋白質(zhì)分子脫水,第二ph值蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)易于沉淀第三,電解質(zhì)濃度在低離子濃度下對蛋白質(zhì)溶解度有較大影響,第四,蛋白質(zhì)濃度濃度越低,其沉淀作用越小第五溫度,在低溫下可以避免乙醇對蛋白質(zhì)。
一有機(jī)溶劑沉淀法 利用與水互溶的有機(jī)溶劑如甲醇乙醇丙酮等能使蛋白質(zhì)在水中的溶解度顯著降低而沉淀的方法,稱為有機(jī)溶劑沉淀二影響因素 1有機(jī)溶劑的選擇 在實(shí)際生產(chǎn)中,常用的有機(jī)溶劑有乙醇丙酮異。
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